商品别名 |
KM-12-SM复苏培养细胞,KM-12-SM复苏培养 |
面向地区 |
|
KM-12-SM复苏培养细胞株哪家
KM-12-SM复苏培养细胞株哪家 "
细胞传代培养的胰酶消化法：
传代培养：是指细胞从一个培养瓶以1：2或1：2以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。
实验步骤：① 入无菌室之前用肥皂洗手，再用75% 的酒精擦拭消毒双手;
② 倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液37℃下预热。
③ 超净台台面应整洁，用75%酒精棉球擦拭清洁;
④ 打开超净工作台的紫外灯照射台面20min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧;
⑤ 点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内。
⑥ 将培养用液瓶口用75%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上。
⑦ 倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下。
⑧ 每个大培养瓶加入1ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中。
⑨ 加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO2的进入，将培养瓶放回CO2培养箱。
⑩ 对悬浮培养细胞，步骤7-9不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。
注意事项
① 传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次好只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材。
② 每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代。
③ 如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。
传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。
对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。" "
细胞培养方面注意的几点：
无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射30分钟灭菌，以70 % ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。
每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % ethanol擦拭无菌操作抬面。
无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。
小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约 45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。
瓶装血清一定要逐步解冻: 4℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃ 解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
热灭活是指56℃，30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后，将血清放入，待温度升高到56℃后计时，一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清（包括不同批次）对细胞的影响。" "
常见培养细胞预防污染的有效措施：
体外培养的细胞受到严重污染时，有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此，防止污染，预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终，才能将发生污染的可能性降到小程度。一般预防可从以下几方面着手：
（1）添加抗生素：各种抗生素性质不同，对各种微生物的作用也不同，联合应用比单用效果好，预防性应用比污染后使用好（但迄今尚无对抗支原体抗生素）。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性，且对细胞本身也有一定影响，因此为避免诱导抗药细菌，应定期更换培养系统中的抗生素，或尽可能不用抗生素处理。
（2）从物品、用品消毒灭菌着手：细胞培养所用物品清洗、消毒要，各种溶液灭菌除菌要仔细，并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时，在无菌过滤操作中，随着滤过体积的增大，滤膜破损的可能性增加，故应选择后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作：75%的酒精搽拭培养箱后，使用可移动的紫外灯至少消毒30min，加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制300ml的饱和硫酸铜加3L 灭菌超纯水混合成硫酸铜溶液加入水槽中。
（3）从操作者做起：①进无菌室前要洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用 75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面。
（4）防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人立进行。
（5）无菌室的消毒①新洁尔灭全面擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，大的优点是便宜，而且可以稀释50倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含37－40%的甲醛。" "
公司提供部分ATCC细胞有(限于页面篇幅，公司全部细胞并未展示，如有具体所需细胞，请咨询我们哦┈技┈术(订┈购)┈热┈线┈：┈０┈２┈１┈５┈４┈３┈８┈７┈６┈５┈６┈(┈１┈８┈３┈０┈１┈９┈０┈８┈２┈７┈９┈微┈信┈同┈号┈)┈联┈系┈Q┈Q：┈１┈２┈９┈２┈７┈５┈２┈１┈５┈７┈)；CRL-12103|FDC-P1细胞；HB-12317|NG108-15细胞；TIB-68|WEHI-3细胞；CCL-89|AtT-20细胞；CRL-1732|Fox-NY细胞；CRL-10609|MMQ细胞；CRL-1443|BC3H1细胞；CRL-1592|IEC-6细胞；CL-101|LLC-PK1细胞；CCL-96|3T6-Swiss albino细胞；CRL-1458|L6细胞；CRL-1378|RBL-1细胞；CCL-167|MPC-11细胞；CRL-1714|TM3细胞；CRL-1715|TM4细胞；CRL-2132|DSL-6A/C1细胞；CCL-92|3T3-swiss albino细胞；CRL-11605|RIN-m5F细胞；CCL-93|V79-4细胞；CCL-163.2|BALB/3T3细胞；CRL-1476|A10细胞；CRL-2111|DT40细胞；CRL-1447|G-7细胞；CRL-2174|Sol8细胞；CCL-198|BLO-11细胞；CCL-197|NOR-10细胞；CRL-1777|HIT-T15细胞；CRL-11506|Beta-TC-6细胞；CCL-26|BS-C-1细胞；CRL-1548|H-4-II-E细胞；TIB-214|CTLL-2细胞；CRL-1658|NIH/3T3细胞；HB-8064|Hep 3B(Hep 3B2.1-7)细胞；TIB-152|Jurkat, Clone E6-1细胞；HTB-15|U-118 MG细胞；CCL-70|CV-1[Part of the Wistar Special Collection]细胞；HTB-81|DU 145细胞；HTB-176|H9细胞；CCL-1|L929细胞；CRL-1586|VERO C1008细胞；CRL-1550|Ca Ski细胞；CCL-222|COLO 205细胞；CL-173|3T3-L1细胞；CCL-240|HL-60细胞；" "
北京朝阳|海淀|通州|房山|丰台|昌平|大兴|顺义|西城|延庆县|石景山|宣武|怀柔|崇文|密云县|东城|平谷|门头沟|广东东莞|广州|中山|深圳|惠州|江门|珠海|汕头|佛山|湛江|河源|肇庆|清远|潮州|韶关|揭阳|阳江|梅州|云浮|茂名|汕尾|山东济南|青岛|临沂|济宁|菏泽|烟台|淄博|泰安|潍坊|日照|威海|滨州|东营|聊城|德州|莱芜|枣庄|江苏苏州|徐州|盐城|无锡|南京|南通|连云港|常州|镇江|扬州|淮安|泰州|宿迁|河南郑州|南阳|新乡|安阳|洛阳|信阳|平顶山|周口|商丘|开封|焦作|驻马店|濮阳|三门峡|漯河|许昌|鹤壁|济源|上海松江|宝山|金山|嘉定|南汇|青浦|浦东新区|奉贤|徐汇|静安|闵行|黄浦|杨浦|虹口|普陀|闸北|长宁|崇明县|卢湾|河北石家庄|唐山|保定|邯郸|邢台|河北|沧州|秦皇岛|张家口|衡水|廊坊|承德|浙江温州|宁波|杭州|台州|嘉兴|金华|湖州|绍兴|舟山|丽水|衢州|陕西西安|咸阳|宝鸡|汉中|渭南|安康|榆林|商洛|延安|铜川|湖南长沙|邵阳|常德|衡阳|株洲|湘潭|永州|岳阳|怀化|郴州|娄底|益阳|张家界|湘西州|重庆江北|渝北|沙坪坝|九龙坡|万州|永川|南岸|酉阳县|北碚|涪陵|秀山县|巴南|渝中|石柱县|忠县|合川|大渡口|开县||荣昌县|云阳县|梁平县|潼南县|江津|彭水县|綦江县|璧山县|黔江|大足县|巫山县|巫溪县|垫江县|丰都县|武隆县|万盛|铜梁县|南川|奉节县|双桥|城口县|福建漳州|厦门|泉州|福州|莆田|宁德|三明|南平|龙岩|天津和平|北辰|河北|河西|西青|津南|东丽|武清|宝坻|红桥|大港|汉沽|静海县|塘沽|宁河县|蓟县|南开|河东|云南昆明|红河|大理|文山|德宏|曲靖|昭通|楚雄|保山|玉溪|丽江|临沧|思茅|西双版纳|怒江|迪庆|四川成都|绵阳|广元|达州|南充|德阳|广安|阿坝|巴中|遂宁|内江|凉山|攀枝花|乐山|自贡|泸州|雅安|宜宾|资阳|眉山|甘孜|广西贵港|玉林|北海|南宁|柳州|桂林|梧州|钦州|来宾|河池|百色|贺州|崇左|防城港|安徽芜湖|合肥|六安|宿州|阜阳|安庆|马鞍山|蚌埠|淮北|淮南|宣城|黄山|铜陵|亳州|池州|巢湖|滁州|湖北武汉|宜昌|襄樊|荆州|恩施州|黄冈|孝感|十堰|咸宁|黄石|仙桃|天门|随州|荆门|潜江|鄂州|神农架林|山西太原|大同|运城|长治|晋城|忻州|临汾|吕梁|晋中|阳泉|朔州|辽宁大连|沈阳|丹东|辽阳|葫芦岛|锦州|朝阳|营口|鞍山|抚顺|阜新|盘锦|本溪|铁岭|黑龙江齐齐哈尔|哈尔滨|大庆|佳木斯|双鸭山|牡丹江|鸡西|黑河|绥化|鹤岗|伊春|大兴安岭|七台河|内蒙古赤峰|包头|通辽|呼和浩特|鄂尔多斯|乌海|呼伦贝尔|兴安盟|巴彦淖尔盟|乌兰察布盟|锡林郭勒盟|阿拉善盟|贵州贵阳|黔东南|黔南|遵义|黔西南|毕节|铜仁|安顺|六盘水|甘肃兰州|天水|庆阳|武威|酒泉|张掖|陇南|白银|定西|平凉|嘉峪关|临夏回族自治州|金昌|甘南|吉林吉林|长春|白山|延边州|白城|松原|辽源|通化|四平|宁夏银川|吴忠|中卫|石嘴山|固原" "
公司已合作单位有广西医科大学、中山大学附属肿瘤医院、复旦大学、南方医科大学、浙江大学医学院附属邵逸夫医院、深圳市孙逸仙心血管医院、福建省立医院、上海宠乐道宠物医院、中国科学院上海高等研究院、北京市昌平区中西医结合医院、中国医学科学院肿瘤医院、云南中医学院、绍兴市人民医院、汕头大学医学院、首都医科大学附属北京同仁医院、解放军总医院、上海瑞金医院、北京宣武医院、吉林大学临床医院、北京中医药大学附属东直门医院、北京天坛医院、复旦大学附属肿瘤医院、河北医科大学第二医院、北京军区总医院、上海市中医医院、浙江省中医院、上海华山医院、哈尔滨医科大学附属医院、西安唐都医院、上海长征医院、广州珠江医院、上海仁济医院、山西省眼科医院、航天中心医院、中山大学肿瘤医院、重庆新桥医院、浙江大学附属第二医院、解放军总医院(301医院)、北京大学第三医院、广州军区广州总院、北京大学人民医院、山西医科大学第二医院、、广州中医药大学附属医院、宁波市第二医院、广州南方医院、西京医院、复旦大学附属中山医院、浙江大学医学院附属医院、重庆医科大学第二医院、北京地坛医院、北京大学医院、中山大学附属医院、天津市肿瘤医院、第二军医大学东方肝胆外科医院、北京肿瘤医院、湖南省肿瘤医院、南方医院、广东省人民医院、北京市广安门医院、北京同仁医院、复旦大学附属眼耳鼻喉科医院、上海仁济医院(西部)、山东大学齐鲁医院、海军总医院" "
C1838 Panc08.13人胰腺癌传代形式细胞株
C1839 Panc10.05人胰腺癌传代形式细胞株
C1840 PANC-28人胰腺癌传代形式细胞株
C1841 PAXC-002人源胰腺癌传代形式细胞株
C1842 PAXC-003人源胰腺癌传代形式细胞株
C1843 PAXC-008人源胰腺癌传代形式细胞株
C1844 PAXC-010人源胰腺癌传代形式细胞株
C1845 PAXC-011人源胰腺癌传代形式细胞株
C1846 PAXC-012人源胰腺癌传代形式细胞株
C1847 PC 61 5.3杂交瘤传代形式细胞株
C1856 PG-BE1人肺巨癌四代细胞的高转移亚系
C1857 PG-LH7人肺巨四代细胞癌低转移四代传代形式细胞株
C1858 PK13猪肾传代形式细胞株
C1859 PLA-802人恶性横纹肌肉瘤
C1860 PsL-EGFmAb-2人源杂交瘤传代形式细胞株
C1861 PSN1人胰腺癌传代形式细胞株
C1862 PT-K75猪鼻甲黏膜成纤维传代形式细胞株
C1864 RA大鼠星形胶质传代形式细胞株
C1867 RCC10RGB人肾四代细胞癌传代形式细胞株
C1869 RD-ES尤因氏肉瘤
C1873 RF952人子宫内膜癌传代形式细胞株
C1874 RKN人卵巢癌传代形式细胞株
C1877 RKO-ppp2Ca人结肠癌传代形式细胞株
C1879 rNSCs-12神经干传代形式细胞株
C1880 ROS1728大鼠成骨传代形式细胞株
C1891 SK-LMS-1人阴户平滑肌肉瘤传代形式细胞株
C1896 SK-N-DZ人成神经瘤四代细胞-骨髓
C1897 SK-N-FI人脑神经母四代细胞瘤传代形式细胞株
C1898 SKOV-3-DDP人卵巢腺癌传代形式细胞株
C1900 SN12C人传代形式细胞株
C1901 SNG-M人子宫内膜癌传代形式细胞株
C1915 SNU-C2A人结肠癌传代形式细胞株
C1916 SP2/MIL-6小鼠骨髓瘤B淋巴传代形式细胞株
C1917 SPCA-1人肺腺癌传代形式细胞株
C1918 ST486人B淋巴四代细胞瘤传代形式细胞株
C1919 SUME-a人鼻咽癌传代形式细胞株
C1920 SUN-449人肝癌传代形式细胞株
C1925 SW 1573人肺泡四代细胞癌传代形式细胞株
C1926 SW 1783人脑星形胶质四代细胞瘤
C1927 SW 1990人胰腺癌传代形式细胞株
C1934 SW954人阴户鳞癌传代形式细胞株
C1936 T1-73人骨肉瘤传代形式细胞株
C1937 T2人淋巴母传代形式细胞株
C1938 TALL-1急性T淋巴四代细胞白血病传代形式细胞株
C1939 TE-14人传代形式细胞株
C1940 TE-15人传代形式细胞株
C1941 TE-4人传代形式细胞株
C1942 TE-5人传代形式细胞株
C1943 TE-6人传代形式细胞株
C1944 TE-8人传代形式细胞株
C1945 TE-9人传代形式细胞株
C1946 TGW人神经母四代细胞瘤
C1947 THLE-2人肝永生化传代形式细胞株
C1948 TK10人肾癌传代形式细胞株"
查看全部介绍
