哺乳动物细胞冻存液

产品名称：哺乳动物细胞冻存液

货号：LZ-PYJ4987

英文名称：CellStore Freezing

产品规格：5×10ml|100ml

本制品是具有特配方的哺乳动物细胞冻存液，其化学组成明确，以DMEM为母液，不含牛血清或其他蛋白成分。具有、低毒、无外源因子和易于使用等优点，推荐用于常规哺乳动物细胞的冷冻保存。

其化学组成明确，以DMEM为母液，不含牛血清或其他蛋白成分。

不含牛血清或其他蛋白成分，不引入造成细胞种子污染的外源因子，如各种牛源病毒和支原体等。

不含牛血清或其他蛋白成分，同样适用于无血清培养的细胞冻存。

不含牛血清或其他蛋白成分，非常适合用于冻存那些在使用常规含牛血清冻存液过程中容易聚团的细胞，如各种293细胞等。

主要包括：

计算—称量—溶解—调pH—分装—灭菌——倒平板等。

计算：，根据配方计算各种营养成分的用量。

称量：使用电子天平准确称取所需，遵循由含量低到含量高的称量原则。

溶解：将称好的成分放入相应玻璃容器中，加入所需量的水，加热使其完全溶解。对于液体培养基，建议使用纯化水。若配制固体培养基，则需称取适量的琼脂放进已称量好的培养基中，继续加热至琼脂全部溶解。

调pH值：待培养基稍冷却后，按配方要求调整pH值。使用10% NaOH溶液（或10% HCl溶液）调整所配培养基的pH。加碱（或酸）溶液时，应边滴加边搅拌，直至后调至要求的pH值。

分装：根据需要将培养基分装于不同的三角烧瓶、试管等。分装的量不宜超过容器的2/3以免灭菌时外溢。分装量根据使用目的和要求决定，但定量分装，便于应用。

灭菌：应按培养基配方中规定的条件及时进行灭菌。普通培养基采用121℃、15min高压湿热灭菌法，以灭菌效果和不损伤培养基的有效成份。

倒平板：灭菌后取出的固体培养基，根据需要可将试管立即斜放，冷凝后即成斜面培养基。液体培养基冷却后可直接根据需要接进菌种。

此外，还包括一些注意事项和操作细节，如使用度1/100的电子天平称取、避免使用铜或铁的容器溶化培养基、调整pH时考虑高压灭菌后的pH变化等。

1、上海准备好干粉培养基、三角瓶、药勺、无菌平皿、油性笔等。在瓶身上标注好培养基的

相关信息。

2、将三角瓶置于电子天平上，调零。按照需要用量，用药勺把干粉培养基添加到三角瓶中。

3、培养基称量之后及时盖上培养基瓶盖，拧紧。用量筒量取适量的蒸馏水或者去离子水。

4、先加入小部分水以湿润干粉，避免粉尘扬起。再加入剩余的水量。充分摇匀。

5、将培养基加热煮至沸腾三次，应可见溶液澄清透亮，无明显琼脂颗粒挂壁，分层等现象。

6、塞上透气硅胶塞，包上牛皮纸或者报纸，包扎好。放入高压灭菌锅中灭菌。（按需设定灭

菌温度、时间）

7、暂时不使用的培养基，可以放入50℃烘箱或者水浴中保温。倒平板时，在超净工作台或

生物安全柜中准备好无菌平皿、记号笔等。

8、颗粒培养基拆开包装后，将无菌培养皿倒置，在底部边缘写上平板相关信息。

9、将标记好的无菌平皿翻转过来，当培养基温度下降到50℃左右时，倾倒培养基。

10、倒完后可轻轻圆周摇晃平板三圈，使平板边缘整齐。将平板铺开可加速琼脂冷却凝固。

11、使用之前，将平板倒置于无菌实验室内的烘箱中，55℃、15 分钟。烘干平板表面水分。

12、将暂时不使用的平板用报纸包成筒状，用记号笔标清楚平板的种类、配制日期。

13、然后放进2-8℃的冰箱中保存。用时取出放置室温下平衡，使用前50℃烘箱烘10 分钟。

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